¿Qué problemas puede dar un HPLC y cómo solucionarlos?




El HPLC es un instrumento muy sensible y versátil, esto hace que sea muy práctico para detectar analitos en pequeñas cantidades, pero a su vez, también puede presentar algunos problemas técnicos debido a pequeñas variaciones o interferencias.

A raíz del tiempo que se lleva usando esta técnica, la mayoría de estos problemas son bien conocidos. Y aquí te detallamos los más comunes además de su solución.

Presión alta

Causa: Se debe a una obstrucción en el sistema en algún punto después de la bomba (en la mayoría de los casos, la columna). 

Solución: Este problema lo podemos solucionar con una limpieza de la parte afectada. Además, se puede evitar que vuelva a surgir filtrando toda fase móvil y muestra que entre en el sistema, ya que no se introducirán partículas indeseadas.

Pérdida de resolución

Causa: Se debe a que la columna está obstruida o está cerca de obstruirse.

Solución: Para solucionarlo se puede seguir los mismos pasos que para la presión alta.




Picos del cromatograma asimétrico

Causa: Se debe a un mal mantenimiento de la columna.

Solución: Limpiar y conservar las columnas como recomienda el fabricante para evitar estos problemas. Para intentar recuperarla se puede hacer pasar una fase móvil filtrada para limpiar la columna lo mejor posible.

Los picos de retención varían

Causa: Se debe a que a la bomba le ha entrado aire.

Solución: para evitar este problema se debe desgasificar la fase móvil antes de introducirla en el sistema. Si la fase móvil está desgasificada correctamente puede deberse a que la junta de cierre del pistón está dañado o mal colocada.

La línea base del cromatograma varía de posición

Causa: se debe a que hay aire atrapado en el detector y sucede por una desgasificación de la fase móvil. 

Solución: Desgasificar correctamente la fase móvil antes de introducirla al sistema.




La línea base presenta mucho ruido

Causa: Esto se da cuando hay aire atrapado en el detector o en la bomba.

Solución: para solucionarlo tenemos que purgar estos puntos del sistema.

El cromatograma muestra picos falsos

Causa: Si se ha verificado que tanto la fase móvil como las muestras no están contaminadas, puede deberse a que en el sistema hay oxígeno disuelto. 

Solución: Para arreglarlo tendremos que desgasificar correctamente la fase móvil.

No hay presión en el sistema

Causa: Esto es debido a que la bomba se ha descebado o hay una fuga en el sistema. 

Solución: Para solucionarlo basta con buscar y reparar la fuga. También puede deberse a que la junta del pistón de la bomba se encuentre en mal estado y haya que sustituirla.




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